阚淑娟,郑丽娜,李云霞,杨建春　　作者单位：唐山市妇幼保健医院儿内科， 河北 唐山

　　【摘要】目的：观察抗癫痫药物奥卡西平对妊娠小鼠的不良作用，探讨叶酸对其不良效应的干预效果。方法：将100只雌性和50只雄性小鼠随机分为5组(雌雄比例2 ∶1)，分别为①空白对照组(灌胃蒸馏水，10 ml/kg);②奥卡西平单次剂量组(150 mg/kg);③奥卡西平二次给药组(上、下午各为75 mg/kg);④奥卡西平单次剂量联合叶酸组(150 mg/kg+0.07 mg/kg);⑤奥卡西平二次给药联合叶酸组(75 mg/kg+0.035 mg/kg)。观察小鼠是否受孕、流产、畸形、死胎、每窝仔鼠的数目及孕期增重情况等指标。结果： ①单次剂量组小鼠的受孕率下降，孕鼠的流产率、死胎率和畸胎率均上升，孕期增重和每窝正常仔鼠数目减少(P<0.05)。②与二次给药组和二次给药联合叶酸组相比，单次剂量组和单次剂量联合叶酸组小鼠的受孕率下降、死胎率上升(P<0.05);③与单次剂量联合叶酸组和二次给药联合叶酸组相比，单次剂量组和二次给药组小鼠的受孕率下降、死胎率上升、孕期增重减少(P<0.05)。结论： 奥卡西平可导致妊娠小鼠妊娠意外的增多，小剂量多次给药以及补充叶酸可降低奥卡西平的不良作用。

　　【关键词】 妊娠; 抗癫痫药物; 叶酸; 死胎; 畸胎; 增重

　　[Abstract]　Objective： The aim of this study was to observe the adverse effects of oxcarbazepine on pregnant mice， and to explore the intervention effect of folic acid on adverse effects. Methods： All of 100 female and 50 male mice were randomly divided into 5 groups (female ∶male=2 ∶1)to be given water or drugs by gavage： blank control group given distilled water 10 ml/kg， single dose group given oxcarbazepine 150 mg/kg， twice dose(a.m. and p.m.)group given oxcarbazepine 75 mg/kg， single dose combined drugs group given oxcarbazepine 150 mg/kg and folic acid 0.07 mg/kg， twice dose combined drugs group(a.m. and p.m.) given oxcarbazepine 75 mg/kg and folic acid 0.035 mg/kg. The indexes including fertilization， abortion， monster， stillbirth， number of filial mice in each brood and the weight during pregnancy were observed among groups. Results： ①The mice in single dose group had lower pregnancy rate， higher rate of abortion， stillbirth and monster， decrease of weight gain during pregnancy and number of normal filial mice each brood(P<0.05). ②Compared to mice in twice dose group and twice dose combined drugs group， the mice in single dose group and single dose combined drugs group had lower pregnant rate and higher stillbirth rate respectively(P<0.05). ③Compared to mice both in single dose group and twice group， the combined with folic acid groups had lower pregnant rate， higher stillbirth rate and decrease of weight gain during pregnancy respectively(P<0.05). Conclusion： Oxcarbazepine can lead to increase pregnant accident of pregnant mice; multiple lower dose and supplement of folic acid can alleviate the adverse reation.

　　[Key words]　pregnancy; anti-epilepsy drugs; folic acid; stillbirth; monster; weight gain

　　根据流行病学调查，癫痫孕妇所生下子代的先天性缺陷发生率比健康对照组人群要高2～3倍[1]。有关抗癫痫药物的致畸机制至今未明。正常妇女每天叶酸的需要量为50～100 mg，妊娠时需要量达500 mg。因而妊娠期经常伴有叶酸缺乏，抗癫痫药物可能会加重叶酸缺乏。Miller等[2]以叶酸缺乏的小鼠血清培养鼠胚，结果很多胚胎生长迟缓，发育异常，补充叶酸后可以促进生长发育，减少畸形。故认为该类药物的致畸作用与血浆叶酸水平降低有密切关系，需及时补充叶酸。本文以妊娠小鼠为研究对象，观察奥卡西平对妊娠小鼠的不良作用，并探讨叶酸对其不良效应的干预效果。

　　1　资料与方法

　　1.1　实验动物

　　SPF级昆明种小鼠150只，雌雄比例2 ∶1，雌性体质量(22.5±2.4)g;雄性体质量(23.8±3.1)g，由北京华阜康生物科技股份有限公司实验动物中心提供，合格证号：SCXK(京)2009-0004。每笼15只(雌10只，雄5只)。自然光照，自由饮水进食，适应性饲养1周。

　　1.2　实验药品

　　叶酸(北京北大药业有限公司，批号：S090528)，规格片剂(0.4 mg/片);奥卡西平(北京诺华制药有限公司，批号：T0051-200805)，规格片剂(150 mg/片);上述所有药物均用蒸馏水配制所需浓度。

　　1.3　动物分组

　　实验共设5组，每组30只，雌性20只，雄性10只。分为①空白对照组：每天灌胃蒸馏水，容量为10 ml/kg体质量;②奥卡西平单次剂量组：每天灌胃奥卡西平，容量为10 ml/kg体质量，给药量为150 mg/kg，相当于成人临床用量的10倍(人按60 kg);③奥卡西平二次给药组：将每天剂量分2次灌胃给药，即上、下午各给药1次(间隔8 h)，每次容量为10 ml/kg体质量，给药量为75 mg/kg;④奥卡西平单次剂量联合叶酸组：每天灌胃奥卡西平，容量为10 ml/kg体质量，给药量为150 mg/kg，相当于成人临床用量的10倍(人按60 kg)，同时添加叶酸0.07 mg/kg，相当于成人临床用量的10倍(人按60 kg);⑤奥卡西平二次给药联合叶酸组：将每天剂量分2次灌胃给药，即上、下午各给药1次(间隔8 h)，每次容量为10 ml/kg体质量，给药量为75 mg/kg，同时添加叶酸0.035 mg/kg。上述各组小鼠于分组后次日，雌性鼠开始灌胃各药物，按上述方法给药，直至妊娠结束。

　　1.4　观察指标

　　每日清晨定时检查雌鼠阴栓，以阴栓出现日为妊娠零天。检出阴道栓的雌鼠进行单独饲养，并密切观察腹部增大情况，有否流产、死胎、畸形、每窝正常仔鼠的数目以及孕期增重情况等指标。

　　1.5　统计方法

　　应用SPSS13.0统计软件进行统计学处理。孕鼠孕期增重和每窝正常仔鼠的数目以均数±标准差(x±s)表示，采用单因素方差分析和组间均数两两比较(SNK-q检验法)进行统计分析;对各组小鼠的受孕率、孕鼠的流产率，死胎率和畸胎率采用行×列表资料的χ2检验。上述分析均采用双侧检验，以α=0.05为统计意义水准。

　　2　结　果

　　2.1　奥卡西平对小鼠受孕、流产和孕鼠死胎、畸胎的影响

　　对小鼠受孕情况、孕鼠及其所产仔鼠的情况观察发现，100只雌性小鼠中有36只小鼠受孕，受孕率36.0%;1只孕鼠发生流产，流产率2.8%;所产仔鼠266只，平均(7.60±1.14)只/窝，其中正常仔鼠242只，占91.0%，死胎仔鼠23只，占8.6%，畸胎仔鼠1只，占0.4%。统计分析显示(表1)，不同组别的小鼠的受孕率、流产率和孕鼠的死胎率、畸胎率的差异均有统计学意义(P<0.05)，其中单次剂量组的小鼠受孕率明显下降，而流产率、死胎率和畸胎率明显上升。与二次给药组和二次给药联合叶酸组相比，单次剂量组和单次剂量联合叶酸组小鼠的受孕率下降、死胎率上升(P<0.05);与单次剂量联合叶酸组和二次给药联合叶酸组相比，单次剂量组和二次给药组小鼠的受孕率下降、死胎率上升(P<0.05)。

　　2.2　奥卡西平对每窝正常仔鼠数目和孕鼠体质量增加的影响

　　除单次剂量组1只孕鼠流产外，其余35只孕鼠产正常仔鼠242只，平均(6.91±1.27)只/窝。孕鼠于妊娠第10天和第20天各称重一次，以观察药物对孕鼠增重的影响。由表2可知，各组每窝正常仔鼠的数目、第10天和第20天孕鼠增重的差异均有统计学意义(P<0.05);与其他各组相比，单次剂量组的每窝正常仔鼠的数目明显下降，第10天和第20天孕鼠增重明显减少(P<0.05)。与单次剂量联合叶酸组和二次给药联合叶酸组相比，单次剂量组和二次给药组孕鼠的第20天孕鼠增重减少(P<0.05)。表1　奥卡西平对小鼠受孕、流产和孕鼠死胎、畸胎的影响表2　奥卡西平对孕鼠每窝仔鼠数和孕期增重的影响

　　3　讨　论

　　奥卡西平是卡马西平的酮基衍生物，用于成人和儿童癫痫部分性发作或全面性发作的单药治疗或添加治疗。奥卡西平是一种无活性的前体物，在肝脏内很快被胞质酶还原成有药理活性的单羟基衍化物(MHD)，MHD具有很强的抗癫痫作用。奥卡西平优于卡马西平之处在于无肝酶诱导作用，生物利用度高(96%)，蛋白结合率低，疗效高[3]。随着医学的不断进步和发展，对癫痫诊断和治疗水平的提高，越来越多的女性癫痫患者能够结婚，并且生儿育女[4]。在妊娠与癫痫的研究中，最关注的是抗癫痫药物对胎儿的影响情况。有研究证实接受抗癫痫治疗的孕妇，胎儿发生畸形的风险为4%～10%[5]，与正常人群相比其后代发生畸形的风险高2～3倍，其中多药联合治疗的孕妇其胎儿发生畸形的风险更高[6]。抗癫痫药物最常见的胎儿畸形有面部发育异常如唇腭裂、先天性心脏病、神经管发育缺陷及泌尿生殖系统缺陷等。总的来说，每一种抗癫痫药物都有致畸性，但引起畸形的类型并无特异性[7]。抗癫痫药物致胎儿畸形机制目前考虑与叶酸缺乏、抗癫痫药物使胎心率减慢和胎儿血流动力学改变、氧化代谢产物机制异常有关。此外抗癫痫药物还可致新生儿缺少维生素K依赖性凝血因子，胎儿生长受限，出生时低体质量和新生儿出血综合征，其围生儿死亡率较正常妊娠高2倍。抗癫痫药物对子代的精神运动性发育和认知功能发展的影响是近年来研究的热点，其中认为丙戊酸钠对子代认知功能影响较大[8]。本研究结果说明单次剂量奥卡西平容易导致孕鼠发生妊娠意外，但是小剂量，多次给药以及补充叶酸可以减少不良作用的发生。因此实际的临床工作中，对于采用抗癫痫药治疗妊娠合并癫痫的孕妇时，要注意最小有效剂量分次使用并及时补充叶酸。

　　【参考文献】

　　[ 1 ]　Dansky LV， Finnell RH. Parental epilepsy， anticonvulsant drugs， and reproductive outcome： epidemiologic and experimental findings spanning three decades; 2： Human studies [J]. Reprod Toxicol， 1991， 5(4)： 301-335.

　　[ 2 ]　Miller PN， Pratten MK， Beck F.Growth of 9.5-day rat embryos in folic-acid-deficient serum[J].Teratology， 1989,39(4)：375-385.

　　[ 3 ]　侯蕴祈.奥卡西平与卡马西平单药治疗脑梗死后迟发型癫痫的对照研究[J].中国当代医药， 2010,17(15)：52-53.

　　[ 4 ]　张碧藻.妊娠合并癫痫34例临床分析[J].大理学院学报，2009,8(10)：69-71.

　　[ 5 ]　Holmes LB，Harvey EA，Coull BA，et al.The teratogenicity of anticonvulsant drugs[J].N Engl J Med,2001， 344(15),1132-1138.

　　[ 6 ]　Wide K，Windbladh B，Kallen B.Major malformations in infants exposed to antiepileptic drugs in utero，with emphasis on carbamzepine and valproic acid：a nation-wide population-based register study[J].Acta Paediatr,2004,93(2)：174-176.

　　[ 7 ]　Vajda FJ.Treatment options for pregnant women with epilepsy[J].Expert Opin Pharmacother， 2008,9(11)：1859-1868.

　　[ 8 ]　Harden CL. Antiepileptic drug teratogenesis： what are the risks for congenital malformations and adverse cognitive outcomes[J]. Int Rev Neurobiol,2008， 83： 205-213.